Solution colorante de Shepard pour déceler l'hémoglobine fœtale (Hb-F) dans le sang
Technique- diluer le sang sous anticoagulant dans du sérum physiologique dans les proportions 1:2 ou 1:3
- préparer des étalements sur des lames porte-objet
- fixer la préparation pendant 5 minutes avec de l'éthanol à 80 %
- sécher et placer la lame dans le réactif opératoire pendant 20 secondes
- rincer à l'eau distillée
- contre colorer avec le contre colorant de Shepard (solution d'éosine 1 %) pendant 3 minutes
- rincer, puis sécher la lame
Résultats- Les cellules contenant l'hémoglobine adulte sont complètement éluées laissant des stromas vides. Les cellules contenant l'hémoglobine F sont colorées en rouge. Les leucocytes sont colorés en gris-pourpre.
Colorant de Kleihauer / Shepard 2 parties- hématoxyline - 500 ml
- chlorure de fer - 250 ml
- la coloration nécessite aussi un contre-colorant éosine et un diluant / fixateur
Colorant de Kleihauer / Shepard kit complet- hématoxyline - 500 ml
- chlorure de fer - 250 ml
- contre-colorant de Shepard - 1L
- diluant / fixateur de Shepard - 1L
Contre-colorant de Shepard- éosine Y 1% solution aqueuse
Diluant / fixateur de ShepardErythrosine solution aqueuse 0,1%- alternative au contre-colorant de Shepard
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